Руководство по репродукции и неонатологии собак и кошек - Британская ассоциация по ветеринарии мелких животных

Проблема: Проблемы с зубами, мешающие нормальной садке.

Действия: Провести осмотр животных перед вязкой.

Проблема: Сниженное либидо, вызванное клиническими заболеваниями и/или дегенерацией тестикулов.

Действия: Диагностировать заболевание и провести лечение.

Проблема: Врожденный дефект — сниженное либидо.

Действия: Исключить животное из племенного разведения, поскольку такие дефекты часто являются наследственными.

СБОР И АНАЛИЗ СПЕРМЫ

Сбор спермы

Сперму собирают с помощью искусственной вагины или электроэякуляции. Кроме двух названных методов практикуется лаваж влагалища после вязки или извлечение сперматозоидов из хвоста придатка после кастрации.

Искусственная вагина

Искусственную вагину изготавливают из резинового «пальца» от пипетки Пастера и небольшой пробирки (фиг. 10.3). Самцу позволяют сделать садку на течную самку и подносят искусственную вагину, направив в нее пенис самца (фиг. 10.4). К недостаткам данного метода можно отнести необходимость присутствия возбужденной самки, а также невозможность проведения манипуляции без предварительной подготовки самца, занимающей 2–3 недели. Процедура завершается успехом лишь в 2/3 случаев. Сбор спермы с помощью искусственной вагины эффективен при работе с лабораторными животными, но редко практикуется в клинических условиях.

Фиг. 10.3.

Искусственная вагина для сбора спермы состоит из резинового «пальца» и пробирки

Фиг. 10.4.

Получение спермы с помощью искусственной вагины

Электроэякуляция

Манипуляция не требует предварительной подготовки кота, однако проводится под общей анестезией для того, чтобы животное не испытывало неприятных ощущений. В прямую кишку вводят ректальный зонд (1 x 12 см), изготовленный из нетоксичного пластика и соединенный с электрическим стимулятором (фиг. 10.5). Зонд снабжен тремя электродами (1,5 мм х 5 см), два из которых (наружные) соединяют между собой, а центральный имеет противоположную полярность. Для предотвращения попадания слизистой прямой кишки между зондом и электродами последние должны плотно прилегать к корпусу зонда. Лаборатория автора использует электроэякулятор, работающий на частоте 50 Гц, снабженный трансформатором, обеспечивающим продолжительные импульсы мощностью от 0 до 30 вольт. Прибор работает от источника напряжения 220 вольт. Сила тока и напряжение регулируются с помощью вольтметра и амперметра.

Фиг. 10.5.

Оборудование для электроэякуляции у котов. Электрический стимулятор и ректальный зонд с тремя электродами

После проведения анестезии зонд смазывают и осторожно вводят в прямую кишку на 7–9 см, направляя электроды вентрально. Пенис обнажают легким нажатием на его основание и подносят к нему лабораторную пробирку. Серия из 80 импульсов мощностью от 2 до 5 вольт обеспечивает эякуляцию (табл. 10.2). Общая последовательность манипуляций включает три серии: 30 стимуляций (по 10 при 2, 3 и 4 вольтах), 30 стимуляций (по 10 при 3, 4 и 5 вольтах) и 20 стимуляций (по 10 при 4 и 5 вольтах). Между сериями делают паузы продолжительностью 2–3 минуты. Стимуляцию начинают, повышая напряжение в течение 1 секунды с 0 вольт до требуемого, после чего выдерживают 2–3 секунды при этом напряжении и резко снижают его до 0, снова выдерживая 2–3 секунды. Существуют иные методики, предусматривающие другие напряжения и длительность стимуляций. Каждый разряд сопровождается реакцией, выражающейся в вытягивании задних конечностей, что указывает на адекватность раздражения. Отсутствие реакции при напряжении 2 вольт и более свидетельствует о неправильном положении электродов или о наличии в прямой кишке каловых масс. В ходе эякуляции часть сперматозоидов попадает в мочевой пузырь, эта особенность эякуляторного процесса является нормой для домашних кошек, но может усиливаться в результате применения альфа-2 стимуляторов адренорецепторов (ксилазин и медетомидин) для седации.

Табл. 10.2. Методика проведения электроэякуляции Вагинальный лаваж после вязки

Метод не распространен в клинической практике, поскольку лишь немногие коты способны к вязке в незнакомом месте, тем более в клинике. Другой недостаток метода заключается в необходимости назначения кошке седативных препаратов, а также в том, что секрет влагалища и жидкость, используемая для процедуры (солевой раствор, подогретый до 37 °C), могут влиять на качество спермы. Метод практикуют при невозможности получить сперму с применением искусственной вагины или электроэякуляции.

Сбор спермы из эпидидимиса

После кастрации сперму получают из хвоста придатка путем вымывания сперматозоидов из протока придатка или измельчения хвоста придатка. Метод применяют при сборе спермы для научных исследований или при необходимости сохранить сперму редкого вида диких животных, погибших в неволе или в результате несчастного случая.

Табл. 10.3. Оценка качества спермы

Все материалы, соприкасающиеся со спермой, должны быть подогреты до 37 ºС для предотвращения холодового шока

Цвет

Белый: высокая концентрация.

Прозрачный: низкая концентрация.

Желтый: контаминация мочой, оказывающей разрушительное воздействие на сперму, часто наблюдается при повышении напряжения свыше 8 вольт при электроэякуляции.

Объем

Измеряется с помощью микропробирки. Перед дальнейшим применением небольшой объем может быть увеличен добавлением буферного или изотонического раствора. Оценку морфологии сперматозоидов проводят перед смешиванием с раствором, поскольку разница в осмотическом давлении может увеличить количество дефектных сперматозоидов.

Подвижность

Подвижность сперматозоидов оценивают по шкале от 0 до 5. Нулевой подвижностью считают ее отсутствие, за 5 принимают активное поступательное продвижение.

Концентрация

Измеряют с помощью специальной камеры (камера Бюркера) под микроскопом. Общее количество сперматозоидов подсчитывают с учетом объема и концентрации на единицу объема

Процентное соотношение сперматозоидов с дефектом головки

Окрашенный образец (карбол-фуксин или нигрозин-эозин) исследуют под микроскопом с 1000-кратным увеличением. Дефектными считают: головку в форме «жемчужины»; головку, имеющую суженное основание, нарушения контура, недоразвитую, отделенную или узкую головку; а также головку, имеющую отклонения в размерах.

Другие дефекты сперматозоидов

Образец фиксируют в формалине и исследуют под фазово-контрастным микроскопом при 1000-кратном увеличении. Дефектами сперматозоидов считают проксимальные включения, дистальные включения, утрату головки, дефекты акросомы, изменения акросомы, изменения тела, удвоение хвостов. К дефектным также относят сперматозоиды, сцепленные хвостами. Кроме того, подсчитывают количество сперматозоидов, не имеющих дефектов.

Присутствие других клеток в эякуляте

В окрашенном образце подсчитывают количество лейкоцитов, сперматогенных клеток и дегенеративных эпителиальных клеток (по Папаниколау).

Нормальное качество спермы

У котов объем эякулята небольшой (до 0,01–0,77 мл). Если сперму собирают с помощью электроэякуляции, то из-за более интенсивной стимуляции добавочных желез ее объем заметно больше, чем при получении с помощью искусственной вагины. Общее количество сперматозоидов в эякуляте составляет от 3 х 106 до 153 х 106, обычно оно выше, когда сперму собирают с помощью искусственной вагины, чем если ее получают методом электроэякуляции. Подвижность сперматозоидов различна и может быть связана с продолжительностью сексуального воздержания. Осмоляльность свежей спермы, собранной с помощью искусственной вагины, составляет около 320 мосм/кг и возрастает при хранении. Сперма содержит много алкалин фосфатазы, ее рН колеблется между 6,6 и 8,77. Содержание нормальных сперматозоидов на уровне 60 % и более считают нормой, при показателе менее 40 % можно говорить о тератозооспермии. Однако связь между качеством спермы и фертильностью у домашних кошек нуждается в дальнейшем изучении. В естественных условиях нормальная фертильность наблюдается и при менее чем 40 % содержании нормальных сперматозоидов в эякуляте. Если сперму получают методом электоэякуляции два раза за короткий промежуток времени, то во втором образце, как правило, отмечается большая подвижность и более высокий процент здоровых сперматозоидов. Был проведен эксперимент: от 15 котов разных пород 2 раза за время одной анестезии брали сперму методом электроэякуляции. Оказалось, что количество здоровых сперматозоидов в первом эякуляте составляет 40,9 %, тогда как во втором возрастает до 54,6 %, притом что первый эякулят отличается более высокой концентрацией. Из изложенного следует, что для определения фертильности целесообразно проводить несколько анализов спермы.